Live-Cell Calcium-Imaging in 3D-Darm-Organoiden
Die Erforschung physiologischer Darmprozesse wie der Nährstoffaufnahme und Wirkstoffinteraktion stützte sich in der Vergangenheit intensiv auf Tierversuche. Diese Methodik-Publikation stellt ein detailliertes Protokoll für das Live-Cell Calcium-Imaging an 3D-Darm-Organoiden vor, welches eine komplett tierfreie und humanspezifische Alternative bietet. Durch den Einsatz des Fluoreszenzfarbstoffs Fura-2-AM lassen sich Rezeptoraktivierungen und Substratflüsse in lebenden Zellen dynamisch und präzise messen. 3D-Darm-Organoide zeigen hierbei eine hervorragende Farbstoffaufnahme und spiegeln die menschliche Darmphysiologie weitaus realistischer wider als tierische Modelle oder einfache 2D-Zellkulturen. Das Verfahren deckt breite Anwendungsbereiche ab, darunter die Untersuchung von Malabsorptionssyndromen, Durchfallerkrankungen und der Wirkstoffaufnahme am Epithel. Damit demonstriert die Arbeit eindrucksvoll, wie komplexe Stoffwechsel- und Transportprozesse ohne jegliches Tierleid direkt an menschlichen Modellen erforscht werden können.